Máquina de detección y extracción de ácidos nucleicos totalmente automática de New Tech

Cinco fuerzas:
● Instrumento configurado con el paso de extracción y purificación de ácido nucleico.
● Instrumento configurado con módulo de extracción ultrasónica
● Instrumento configurado con modo totalmente automático.
● Instrumento configurado con amplificación de temperatura variable
● Instrumento configurado con un kit de reactivos completamente cerrado

1. ¿Es necesario extraer y purificar los reactivos de detección de ácidos nucleicos?
El principio de detección de ácido nucleico es el siguiente: bajo la acción del cebador, la ADN polimerasa se utiliza para realizar una amplificación por reacción en cadena en el ADN/ARN molde (que requiere la transcripción inversa de NA), y luego se detecta la cantidad de señal fluorescente liberada para determinar si la muestra contiene el ácido nucleico (ADN/ARN) del patógeno a detectar.

1) Las muestras que no han sido extraídas o purificadas pueden contener muchos componentes que afectan el resultado final: nucleasa (que puede disolver el ácido nucleico objetivo y causar falsos negativos), proteasa (que puede reducir la ADN polimerasa y causar falsos negativos), metales pesados sal (que conduce a la inactivación de la sintasa y provoca falsos positivos), PH demasiado ácido o demasiado alcalino (que puede provocar que la reacción falle), ARN incompleto (que conduce a un fallo de la transcripción inversa falso negativo).

2) Algunas muestras son difíciles de amplificar directamente: Gram positivas y algunos parásitos, debido a sus gruesas paredes celulares y otras estructuras, si no pasan por el proceso de extracción y purificación del ácido nucleico, el kit sin extracción puede fallar en tales casos. muestras.

Por lo tanto, se recomienda seleccionar el kit o instrumento de prueba configurado con el paso de extracción de ácido nucleico.

2. ¿Extracción química o extracción física por fragmentación ultrasónica?
En términos generales, la extracción química se puede aplicar a la mayor parte del pretratamiento y la purificación.Sin embargo, en las bacterias Gram positivas de paredes gruesas y en algunos parásitos, también se da el caso de que la extracción química no puede obtener plantillas de ácido nucleico eficaces, lo que da lugar a una detección de falsos negativos.Además, la extracción química a menudo utiliza agentes fuertes; si la elución no es completa, es fácil introducir álcalis fuertes en el sistema de reacción, lo que da como resultado resultados inexactos.

La fragmentación ultrasónica utiliza trituración física, que ha sido utilizada con éxito por GeneXpert, una empresa líder en el campo de POCT para uso humano, y tiene una ventaja absoluta en la extracción de ácido nucleico de algunas muestras complejas (como Mycobacterium tuberculosis).

Por lo tanto, se recomienda seleccionar un kit o instrumento de prueba configurado con un paso de extracción de ácido nucleico.y es óptimo si hay un módulo de extracción ultrasónico.

3. ¿Manual, semiautomático y completamente automático?
Este es un problema de costo laboral y eficiencia laboral.En la actualidad, los hospitales de mascotas carecen de personal suficiente, y la extracción y detección de ácidos nucleicos es un trabajo que requiere ciertas habilidades y experiencia.No hay duda de que la máquina de detección y extracción de ácidos nucleicos totalmente automática es la elección perfecta.

4. ¿Amplificación a temperatura constante o amplificación a temperatura variable?
La reacción de amplificación es un vínculo de detección de ácidos nucleicos y la tecnología profesional involucrada en este vínculo es compleja.En términos generales, las enzimas se utilizan para amplificar el ácido nucleico.En el proceso de amplificación se detecta la señal de fluorescencia amplificada o la señal de fluorescencia incorporada.En términos generales, cuanto antes aparezca la señal de fluorescencia, mayor será el contenido del gen diana en la muestra.

La amplificación a temperatura constante es una amplificación de ácido nucleico a una temperatura fija, mientras que la amplificación a temperatura variable es una amplificación cíclica estrictamente de acuerdo con la desnaturalización-hibridación-extensión.Se ha llevado a cabo el tiempo de amplificación a temperatura constante, mientras que el tiempo de amplificación a temperatura variable se ve muy afectado por la velocidad de aumento y caída de temperatura del instrumento (en la actualidad, muchos fabricantes han podido realizar 40 ciclos de amplificación en aproximadamente 30 minutos).

Si las condiciones del laboratorio son buenas y la zonificación es estricta, es razonable decir que la diferencia de precisión entre los dos no será grande.Sin embargo, la amplificación a temperatura variable sintetizará más productos de ácido nucleico en un tiempo relativamente más corto.Para los laboratorios sin una zonificación estricta y personal capacitado profesional, el riesgo de fuga de aerosoles de ácido nucleico será mayor, el falso positivo ocurre una vez que ocurre la fuga y es extremadamente difícil de eliminar.

Además, la amplificación a temperatura constante también es más propensa a una amplificación no específica cuando la muestra es compleja (la temperatura relativa de la reacción es menor y cuanto mayor es la temperatura de extensión, mejor es la especificidad de unión del cebador).

En lo que respecta a la tecnología actual, la amplificación de temperatura variable es más confiable.

5. ¿Cómo evitar el riesgo de fuga de productos de amplificación de ácidos nucleicos?
En la actualidad, muchos fabricantes eligen el tubo de PCR tipo glándula como tubo de reacción de ácido nucleico, que está sellado por fricción, y la desnaturalización de temperatura en la amplificación de PCR de temperatura variable alcanza los 90 grados.
Centígrados.El proceso repetido de expansión con calor y contracción con frío es un gran desafío para el sellado del tubo de PCR, y es relativamente fácil que el tubo de PCR tipo glándula cause fugas.

Es preferible adoptar la reacción con un kit/tubo completamente sellado para evitar fugas del producto de reacción.Sería perfecto si se pudiera elaborar un kit completamente sellado para la extracción y detección de ácidos nucleicos.

Por lo tanto, la nueva máquina de detección y extracción de ácidos nucleicos totalmente automática de New Tech tiene las cinco opciones óptimas mencionadas anteriormente.